在太平洋白对虾和尼罗罗非鱼的水产养殖试验中，安迪苏的水产饲料添加剂 Bacti-nil® Aqua 能有效预防疾病并促进生长。
近年来，水产养殖业的持续增长产生了许多瓶颈，无论从环境还是经济角度来看，都无法使其扩张、转型和集约化更具可持续性（Nathan Young 等人，2019 年）。
鱼类养殖最大的生产限制之一是传染病的影响（Yanong 等，2022 年）。在可能对水产养殖造成问题的传染性病原体中，细菌性疾病被认为是 "大敌"（Pridgeon 等人，2012 年），因为在许多情况下，尽管没有适当的估计和科学记录，但它们作为次要病原体与重要的主要病原体同时或共同感染。考虑到水产养殖是在一个充满潜在细菌病原体的水生环境中进行的，而且养殖的鱼类处于高应激水平，发生细菌性疾病的几率极高，包括单纯的细菌性疾病和与其他病原体一起发生的细菌性疾病（Soliman等人，2019）。
因此，开发、验证和应用功能性水产饲料添加剂，最大限度地减少主要细菌性疾病对水产养殖物种的影响，对可持续发展至关重要。如今，科学界正集中精力寻找动物生产中使用抗生素的有效替代品（Defroird 等人，2011 年；Ronghua 等人，2020 年）。
本文介绍了一种基于短链和中链有机酸协同混合物的功能性水产饲料添加剂（Bacti-nil®Aqua）的功效，该添加剂可作为一种预防性策略，减少尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）和太平洋南美白对虾（Litopenaeus vannamei）中主要细菌病原体的影响。
就尼罗罗非鱼而言，该添加剂在控制东方弗朗西斯菌感染方面进行了评估，东方弗朗西斯菌是一种高致病性细胞内细菌病原体，在低水温时期非常常见。对于对虾，则测试了该添加剂对急性肝胰腺坏死病（AHPND）（又称早期死亡综合症（EMS））主要致病菌（一种高致病性副溶血性弧菌菌株）的功效。这两种细菌性疾病对全球两种养殖物种都造成了破坏性影响，促使养殖户、兽医和饲料制造商评估合适且可负担的预防和治疗方法（Kumar 等人，2021 年；Soto 等人，2021 年）。间接而言，Bacti-nil® Aqua 还旨在减少对抗生素使用的依赖，并将抗生素耐药性降至最低。
对来自墨西哥的高致病性副溶血性弧菌现场菌株（M0904）的添加剂功效进行了活体测试。将每只 4 至 5 克重的太平洋南美白对虾（又称白脚虾）标本放养在九个容量为 10 升的水族箱中，密度为每个水族箱 10 只，水质为盐水（35 ppt），在 24 小时的实验期间保持在 29 摄氏度（C）。
副溶血性弧菌的感染是通过浸泡每个水族箱 50 毫升的接种体（1 x 108 CFU/毫升）进行的。在商业虾饲料配方上涂抹添加剂。总共评估了三组1) 阴性对照组（未添加添加剂且未感染）；2) 阳性对照组（未添加添加剂且已感染）；3) 含量为 0.3% 的 Bacti-nil® Aqua（每公吨饲料添加 3 千克添加剂且已感染）。虾感染后 15 分钟投喂一次，然后每隔三小时投喂一次。
图 1：用副溶血性弧菌 (M0904) 对凡纳滨鲤进行 24 小时感染挑战后的存活率，以评估 Bacti-nil® Aqua 的影响。
感染副溶血性弧菌的症状包括触角变红、肌肉翳、肝胰脏变色和褥疮，这些症状在感染后一小时即可发现。感染 24 小时后评估累积死亡率。阳性对照组的存活率降低到 13%，而添加了 Bacti-nil® Aqua 添加剂的组的存活率几乎是阳性对照组的五倍（60%）（图 1）。
据报道，与副溶血性弧菌感染有关的组织病理学发现包括肝胰腺小管上皮细胞脱落和由于毒素分泌造成的溶血浸润（Li 等，2017 年）。这些组织病理学结果与挑战结束时在存活动物身上发现的结果一致。阳性对照组（无添加剂）的特点是肝胰腺小管细胞脱落，近端肠道出现血淋巴和血细胞浸润（图 2）。相比之下，Bacti-nil® Aqua 添加剂部分缓解了这些组织学临床症状，因为尽管有血淋巴和血细胞浸润，肝胰腺小管的结构仍得以保持。
图 2：万年青在 24 小时感染副溶血性弧菌后肝胰腺和近端肠道的组织病理学。
A)阴性对照（CTRL -）：
B)阳性对照（CTRL +）：
C)阳性对照 (CTRL+)：
D)Bacti-nil® Aqua 0.3%：正常肝胰腺小管有血淋巴和血细胞浸润。
东方弗朗西斯菌被选为合适的候选菌种，用于评估添加剂在最大程度减少感染影响方面的功效。东方弗朗西斯菌是一种高致病性的兼性细胞内细菌，这为评估该添加剂在细胞外和细胞内细菌种类中的功效提供了一个很好的机会。弗氏杆菌病会引起内脏和肌肉组织病变，导致鱼类死亡率高、生长性能低下，并因最终产品的质量有限而造成重大经济损失。
在体内试验中，35 至 40 克重的尼罗罗非鱼幼鱼经过 7 天的适应性养殖，并在 20 天的适应性养殖期间接受 Bacti-nil® Aqua 作为功能性饲料添加剂，添加量为每公斤饲料 5 克（实验中使用尼罗罗非鱼商用颗粒饲料），直到实验感染为止。感染途径是浸泡三小时，浓度为 1.5 × 107 CFU/ml。分为三组：1）阴性对照组（无感染，不使用添加剂）；2）阳性对照组（感染挑战，不使用添加剂）；3）添加剂处理组（感染挑战，使用添加剂）。
使用 Bactinil® Aqua 处理的罗非鱼标本死亡率比阳性对照组（不使用添加剂；感染）低 26%，如图 3 所示。
图 3：使用 Bacti-nil® Aqua（每公斤 5 克）处理尼罗罗非鱼后，其累积死亡率。
我们目前的研究结果表明，Bacti-nil® Aqua 能有效减少凡纳米对虾的 AHPND 和尼罗罗非鱼的弗朗西斯菌病。功能性添加剂在水产养殖业从 "治愈 "或 "治疗 "感染到 "预防 "减少疾病影响的转变过程中发挥着至关重要的作用。
预防性应用功能性水产饲料添加剂，同时采用最佳的养殖管理和生物安全策略，是在水产养殖中最大限度地减少疾病影响和抗生素使用的有效选择。有鉴于此，Bacti-nil® Aqua 已被证明是一种有效的抗菌剂，可减少弧菌病和弗兰西斯菌病的影响。这种直接的抗菌功效归功于特定中短链有机酸的协同组合。补充的间接益处包括更好地保护免疫反应、减少肝胰腺损伤和促进生长。
总之，使用这种水产饲料添加剂是预防疾病和促进生长的有效工具。根据这些经验，在对虾和罗非鱼的生产条件下使用 Bacti-nil® Aqua 可显著减少细菌性疾病的影响和累积死亡率，从而增加生物量，提高养殖收益。
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