在不同膳食胆固醇水平下提高性能

28.03.23
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作者:Yu-Hung Lin 和 Waldo G. Nuez-Ortín

多年来,水产养殖业一直寻求通过减少水产饲料中鱼粉的使用来提高可持续性。由于营养成分均衡且易于获得,豆粕是虾饲料中鱼粉的广泛替代品。然而,由于豆粕缺乏某些营养成分,尤其是胆固醇,因此在对虾饲料中使用豆粕应慎重考虑。胆固醇是对虾的关键膳食需求,因为对虾缺乏从头合成这种营养素的能力(NRC,2011 年)。据报道,白对虾对胆固醇的需求量为 0.11-0.14%(NRC,2011 年),而目前标准对虾饲料配方中的胆固醇水平在 0.05%-0.1%之间。因此,增加豆粕添加量会降低对虾肝胰腺和血液淋巴中的胆固醇浓度(Lin 等人,2017 年)。这种低胆固醇血症可归因于豆粕中胆固醇的缺乏和对虾对胆固醇的利用率低。

虾缺乏胆汁系统,因此其脂肪消化过程不如鱼类有效。实践证明,基于天然乳化剂的消化促进剂能够补充乳化过程,优化胆固醇等重要脂质营养物质的消化和利用。

 

Aqualyso®安迪苏) 是一种溶血磷脂基添加剂,通过磷脂酶 A2 受控水解大豆卵磷脂中的磷脂而制成。卵磷脂有助于脂质的消化和吸收。鉴于乳速来 的乳化性能优于卵磷脂,目前在对虾饲料中的一个常见应用是替代卵磷脂,以降低配方成本并保持生长性能。我们进行了一项生长试验,研究溶血磷脂乳速来 在目前含有高浓度和低浓度胆固醇的对虾饲料配方中的益处。对鱼粉和豆粕的膳食水平进行了调整,以在实验饲料中提供高(0.12%)和低(0.05%)的胆固醇浓度。

实验装置

表 1 列出了配制的四种等蛋白和隔离脂实验饲料。设计了两种含 1%卵磷脂的对照饲料,胆固醇浓度有高有低:高胆固醇日粮(HIGH CHOL, 0.12%)和低胆固醇日粮(LOW CHOL, 0.05%)。两种配方中都添加了 0.1% 的乳速来(AQL):高 CHOL+0.1% AQL 和低 CHOL+0.1% AQL。使用直径为 2 毫米的压片机制作沉虾颗粒,在 60°C 的烘箱中烘干,并在 -20°C 下保存至使用。

在密闭循环系统中,将四种试验饲料随机分配到 12 个水箱(300 升,每个处理 3 个重复)中。每个水箱放养 20 只虾(2.39±0.02g)。该系统包括生物过滤器、蛋白质撇渣器和紫外线灯,以保持水质。饲养系统的水温控制在 28 ± 1°C。每天分别在 7:00、12:00、17:00 和 22:00 投喂 4 次,投喂量为虾湿重的 6%。每两周对对虾称重一次,同时更换一半的饲养水。对虾喂食实验饲料 8 周。

 HIGH CHOL高胆固醇 + 0.1% AQL低胆固醇低胆固醇 + 0.1% AQL
成分 (%)    
鱼粉202077
大豆粉252543.543.5
鱼油3311
大豆油(精炼)0033
大豆卵磷脂1111
Aqualyso®00.100.1
α-纤维素6.56.03.02.5
其他*29.929.929.929.9
成分 (%)    
水分9.3211.049.9611.01
灰烬7.626.407.576.72
粗蛋白37.1536.6837.1536.85
粗脂肪7.647.907.748.12
胆固醇0.1180.0520.1220.053
*包括 15%发酵大豆粉、8%玉米淀粉、10%α-淀粉、7%乌贼肝粉、1.5%氯化胆碱、1%维生素预混料和 2%矿物质预混料。
表 1.实验日粮的配方和成分

喂养试验结束后,对对虾进行称重,以计算其生长性能。随后,在每个水箱中随机采集两只虾的肝胰脏。测量消化酶(包括糜蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶)的基因表达。引物设计和相对定量遵循 Castro-Ruiz 等人(2021 年)以及 Livak 和 Schmittgen(2001 年)的描述。

Data was assessed for normality and variance homogeneity using the Kolmogorov-Smirnov test and Bartlett’s test, respectively. The results were analysed by a one-way analysis of variance (ANOVA). When the ANOVA identified differences among the groups, multiple comparisons were made among the means using the Duncan’s multiple range test. Statistical significance was determined by setting the aggregate type I error to p<0.05.

补充营养有助于提高生长性能

补充溶血磷脂消化
增强剂有助于提高喂食高胆固醇和低胆固醇饲料的对虾的饲料摄入量和生长性能(图 1)

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Figure 1. Effects of dietary lysophospholipids (Aqualyso®, AQL) on feed intake (A), weight gain (B) and specific growth rate (C) of white shrimp fed diets with high cholesterol (HIGH CHOL) or low cholesterol (LOW CHOL). Bars with different letters indicate significant differences (p<0.05).
 
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Figure 2. Effects of dietary lysophospholipids (Aqualyso®, AQL) on relative gene expression of chymotrypsin (A), trypsin (B), amylase (C) and lipase (D) of white shrimp fed diets with high cholesterol (HIGH CHOL) or low cholesterol (LOW CHOL). Bars with different letters indicate that they are significantly different (p<0.05) from one another.

添加高胆固醇和低胆固醇饲料后,采食量分别提高了 13% 和 21%。添加乳速来的高胆固醇饲料的生长效果最好,增重和特定生长率(SGR)分别显著提高了 16% 和 11%。在低胆固醇饲料中也观察到了类似的模式;在补充胆固醇后,增重和特定生长率分别提高了 10%和 8%。更有趣的是,在低胆固醇饲料中添加的添加剂与高胆固醇饲料的性能相匹配,这证明了溶血磷脂消化增强剂在降低配方成本的同时还能保持更优质饲料性能的功效。添加剂对胆固醇含量高的日粮和胆固醇含量低的日粮的饲料转化效率没有明显影响。胆固醇水平和添加剂都不影响存活率,所有处理的平均存活率为 76%。

我们之前已经证明,0.1% 的溶血磷脂消化强化剂可以成功替代含有 2% 卵磷脂的对照饲料中 0.75-1% 的卵磷脂(Lin 等,2021 年)。在本研究中,所有日粮中平均添加 1%的大豆卵磷脂,以满足对虾对磷脂的最低要求(NRC,2011 年)。在这样的配方策略下,高胆固醇饲料和添加乳速来的低胆固醇饲料的生长性能相似,这可能是由于 1%卵磷脂饲料中的添加剂可改善消化乳化作用,促进胆固醇更有效的吸收和利用。

以往对鱼类(如多宝鱼和鲴鱼)的研究也报道了补充溶血磷脂的积极作用,据信这与更好地吸收和利用必需脂质营养素有关(Li等人,2019年;Liu等人,2019年)。在三文鱼中,最近未发表的数据显示,乳速来 可加速肠道对营养物质的吸收和运输,以及肝脏对营养物质的加工。

影响消化酶的活性

本研究还表明,乳速来 可能会影响消化酶的活性。蛋白酶(如糜蛋白酶和胰蛋白酶)的基因表达分析显示,高胆固醇和低胆固醇饲料中的蛋白酶都出现了上调(图 2)。然而,只有在高胆固醇饲料中的补充被证明是显著的。淀粉酶和脂肪酶也出现了类似但不明显的上调模式(图 2)。具体来说,在低胆固醇饲料中,溶血磷脂的补充使脂肪酶的基因表达发生了 1.5 倍的变化,这表明由于乳化作用的增强,脂肪酶的活性得到了优化。蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶基因表达的调控模式与添加乳速来 饲料组的采食量增加和生产性能提高相一致,表明生产性能的提高可归因于采食量的增加以及消化机制跟上了消化需求的增长。

总之,我们在本研究中证明,以 0.1% 溶血磷脂为基础的 Aqualyso® 可改善喂养不同胆固醇水平的对虾的生长性能和消化酶基因表达。鉴于需要进一步减少对虾饲料中的鱼粉含量,以及卵磷脂成本的不断增加,在卵磷脂替代策略下补充乳速来 似乎是促进可持续性、优化饲料成本和对虾饲料性能的有效策略。

安迪苏 的水产营养平台继续将针对特定物种的乳速来 应用策略研究与配方经验相结合,同时提供与饲料配方和加工相关的服务。

 

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